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Z6·尊龙凯时 pEGFP-ADRB2人源质粒

发布时间:2025-08-04   信息来源:尊龙凯时官方编辑

Z6·尊龙凯时推出的产品名称为

pEGFP-ADRB2(human)质粒,规格为05ug质粒干粉。收到产品后,请依据产品管壁标签判断产品形式,并在扩增前确认该质粒菌株的抗性、感受态以及培养温度。

Z6·尊龙凯时 pEGFP-ADRB2人源质粒

EGFP-ADRB2(human)质粒扩增流程

根据产品形式,接下来的操作步骤将确保您能正确地使用Z6·尊龙凯时的质粒。

1. 质粒干粉处理

质粒干粉常温运输,需存放于-20℃,保质期为90天。请务必进行转化并挑选单克隆培养,不可直接使用或测序。

  1. 收到质粒干粉后,用5000rpm离心1分钟,然后加入20μl去离子水溶解质粒。
  2. 取1支100μl感受态于冰上解冻10分钟,加入2μl质粒,在冰浴中处理30分钟后,进行42℃热激60秒,再冰浴2分钟。(从此步开始,请在超净工作台中进行无菌操作)
  3. 加入900μl无抗LB液体培养基,以180rpm震荡于37℃培养45分钟。
  4. 以6000rpm离心5分钟,仅保留100μl上清液,重悬细菌沉淀后,对目标质粒抗性的LB平板进行涂布。
  5. 平板正向培养1小时,之后倒置37℃培养14小时。如果培养温度为30℃则需培养20小时。(如菌落过多,请对质粒进行稀释后再转化。若无菌落,则添加10μl质粒进行转化。请切勿直接转表达感受态,需先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态。)
  6. 挑取单个菌落至LB液体培养基中,添加相应抗生素,以220rpm震荡培养14小时,按照实验需要及质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

2. 其他产品形式处理

对于甘油菌种(冰袋运输,-80℃存放,保质期90天),请务必划线挑取单菌落进行培养。液体质粒(冰袋运输,-20℃存放,90天保质期)收到后可直接使用。

3. 注意事项

使用之前,请在Buffer P1中加入一小管RNA酶,存于4℃。为提升提取效率,Buffer EB可在65~70℃水浴预热。对于更多的质粒载体信息,请联系Z6·尊龙凯时

实验原理概述

采用碱裂解法提取质粒,通过利用共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA在拓扑学上的差异进行分离。具体步骤涉及pH的变化及适当的缓冲液使用,确保质粒的高纯度和效能。

以上是使用Z6·尊龙凯时产品的完整操作流程,确保实验步骤的严谨性和科学性,实现期望的实验效果。